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谷氨酰胺酶基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 135 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 盧 彪,吳擁軍,吳玉俊,羅 熹,劉艷敏
關(guān)鍵詞: 谷氨酰胺酶;glsA;原核表達(dá);IPTG誘導(dǎo)
摘要:

為驗(yàn)證谷氨酰胺酶基因glsA2的酶活力,以pET-32a為表達(dá)載體構(gòu)建原核表達(dá)重組質(zhì)粒pET32a-glsA2,轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株E.coli BL21(DE3)。從異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)的誘導(dǎo)濃度及誘導(dǎo)表達(dá)時間兩方面對重組菌株glsA2基因的表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果顯示,0.1mmol/L IPTG誘導(dǎo)6h,谷氨酰胺酶活力達(dá)到608.2U/μg,約為對照的15倍。

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