
為建立適用于蜂王漿蛋白質(zhì)組研究的雙向電泳技術(shù),對(duì)其中的IPG膠條的選擇、蛋白質(zhì)上樣量、等電聚焦時(shí)間及SDS-PAGE凝膠濃度等關(guān)鍵步驟進(jìn)行探索和優(yōu)化。結(jié)果顯示:蜂王漿蛋白質(zhì)pH值主要分布在pH 5~8范圍內(nèi),當(dāng)上樣量為150μg,聚焦時(shí)間達(dá)到32000V·h的情況下能充分地聚焦,第二向使用10%的梯度膠時(shí)獲得的雙向電泳圖譜最佳,在優(yōu)化后的蜂王漿雙向電泳圖譜上可檢測(cè)到62±4蛋白點(diǎn),重復(fù)性高,分辨率較好。優(yōu)化后的雙向電泳技術(shù)體系適合于蜂王漿全蛋白質(zhì)的雙向電泳分析。
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