采用掃描電子顯微鏡、單細胞拉曼光譜技術(shù)對比分析德氏乳桿菌保加利亞亞種ND02(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus ND02)正常及其非可培養(yǎng)態(tài)(viable but non-culturable,VBNC)細胞的表觀形態(tài)和細胞內(nèi)部大分子化合物的變化。掃描電子顯微鏡結(jié)果顯示,與正常細胞相比,德氏乳桿菌保加利亞亞種ND02的VBNC態(tài)細胞變短、變粗,且細胞表面發(fā)生褶皺;VBNC態(tài)細胞的拉曼光譜與正常細胞差異顯著,主要集中在1 673、1 650、1 459、1 030、1 005 cm-1等處的12 個峰,主要反映細胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子變化,結(jié)果表明德氏乳桿菌保加利亞亞種ND02在誘導(dǎo)進入VBNC態(tài)時可能通過調(diào)整核酸、脂類和蛋白質(zhì)適應(yīng)不利環(huán)境的影響;研究結(jié)果也證實拉曼光譜技術(shù)可以在單細胞水平上對德氏乳桿菌保加利亞亞種ND02及其VBNC態(tài)細胞內(nèi)大分子物質(zhì)進行無損、無標(biāo)記檢測分析。
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