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高效合成L-高絲氨酸大腸桿菌基因工程菌株的構(gòu)建
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 179 發(fā)表時間: 2022-05-30
作者: 張宇,夏利,林蓓蓓,張穩(wěn)杰,徐皓然,張成林
關(guān)鍵詞: L-高絲氨酸;代謝工程;大腸桿菌;外排
摘要:

針對現(xiàn)有L-高絲氨酸生產(chǎn)菌株因營養(yǎng)缺陷需在發(fā)酵過程中添加L-蘇氨酸等物質(zhì)的問題,以大腸桿菌為底盤細胞,構(gòu)建1?株非營養(yǎng)缺陷型L-高絲氨酸高產(chǎn)菌株。首先通過下調(diào)thrB和thrC的轉(zhuǎn)錄弱化L-高絲氨酸的降解途徑;并過表達thrA、ppc和pntAB以強化L-高絲氨酸合成代謝流、提高前體物以及輔酶供應(yīng);在此基礎(chǔ)上過表達rhtA增強L-高絲氨酸輸出。獲得的菌株H-10經(jīng)5?L發(fā)酵罐發(fā)酵48?h,L-高絲氨酸產(chǎn)量達到52.1?g/L,轉(zhuǎn)化率為43%(以占葡萄糖質(zhì)量計),均高于現(xiàn)有報道。

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