建立柱切換法液相色譜測(cè)定保健食品中VA、VD、VE含量的方法。參照GB 5009.82—2016《食品中維生素A、D、E的測(cè)定》樣品前處理方法,以Agilent Poroshell 120 PFP(4.6 mm×100 mm,2.7 μm)為一維色譜柱,甲醇、水為流動(dòng)相梯度洗脫,分離VA和VE的4 種異構(gòu)體,以Agilent Zorbax Eclipse PAH(2.1 mm×100 mm,3.5 μm)為二維色譜柱,甲醇、乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫,分離VD2和VD3。以Agilent Poroshell 120 EC C18(4.6 mm×5 mm,4 μm)為捕獲柱,捕獲VD。根據(jù)VD在一維色譜柱上的出峰起止時(shí)間,確定柱切換時(shí)間。一維檢測(cè)波長(zhǎng)為325 nm和294 nm,二維檢測(cè)波長(zhǎng)為264 nm。以外標(biāo)定量法測(cè)定VA、VD、VE的含量。結(jié)果表明,VA在2.50~50.0 μg/mL、VD在0.10~2.00 μg/mL、VE在5.00~100.0 μg/mL線性范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.999。回收率為86%~102%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%~4.0%。表明該方法測(cè)定準(zhǔn)確,適用于保健食品中VA、VD、VE的含量測(cè)定。
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