通過加入琥珀酸酐對大豆分離蛋白(soybean protein isolate,SPI)進(jìn)行改性,探究琥珀酰化調(diào)控SPI電荷密度引起的構(gòu)象改變和乳化性改善之間的關(guān)系。通過熒光光譜、紫外光譜、傅里葉變換紅外光譜分析不同酰化程度SPI的構(gòu)象變化,采用掃描電子顯微鏡、電位、表面疏水性、分子柔性及乳化性等手段表征琥珀酰化對SPI理化性質(zhì)的影響。結(jié)果表明:琥珀酰化反應(yīng)發(fā)生,琥珀酰基基團(tuán)成功接枝于SPI上,SPI等電點(diǎn)下降,電負(fù)性增強(qiáng);SPI微觀結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變化,光滑無規(guī)則片狀結(jié)構(gòu)的表面出現(xiàn)小孔穴,分子質(zhì)量增加;電荷密度的增加導(dǎo)致SPI三級結(jié)構(gòu)展開,色氨酸暴露,酪氨酸被包裹,熒光光譜和紫外光譜出現(xiàn)紅移現(xiàn)象,證明酰化后的SPI處于更親水的環(huán)境中;SPI游離氨基與琥珀酰基基團(tuán)反應(yīng)使得其中N—H鍵變?yōu)镃—N鍵,導(dǎo)致酰胺III帶改變;酰化后的SPI表面疏水性下降,分子柔性增加,乳化活性與乳化穩(wěn)定性得到改善。該研究證實(shí),琥珀酰化SPI電荷密度的增加可以影響SPI的空間構(gòu)象從而使乳化性明顯改善。
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