以羧基化的超順磁納米磁珠作為離子交換吸附介質(zhì),建立一種新型的非層析離子交換吸附方法,用于對兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗體進行純化。通過優(yōu)化吸附、洗脫緩沖液pH值、鹽離子濃度以及洗滌液Tween-20體積分數(shù),確立磁珠離子交換吸附純化條件,并將該純化方法和辛酸-硫酸銨法、親和層析法進行比較。結(jié)果表明:血清中的多克隆抗體能夠在pH6.0的磷酸鹽緩沖液(0.01mol/L)中被磁珠完全吸附,經(jīng)過含0.1% Tween-20的洗滌液兩次洗滌,能夠達到較好的洗滌效果,用含0.3mol/L NaCl的磷酸鹽緩沖液(pH8.0)可以將吸附的抗體洗脫;經(jīng)該法純化后,多抗純度為82.6%,回收率為58.0%,效價為1/64000;每克磁珠可純化10mL的血清,整個過程只需要1h。該方法和辛酸-硫酸銨法、親和層析法相比有明顯的優(yōu)勢,因此具有較好的應用前景。
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