領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
探索牛β-防御素BNBD11原核表達(dá)及純化的技術(shù)路線。根據(jù)已報(bào)道的BNBD11的氨基酸序列，兼顧大腸桿菌密碼子偏好性，設(shè)計(jì)合成BNBD11基因。構(gòu)建重組表達(dá)載體pET32a-BNBD11，轉(zhuǎn)入E.coli BL21，用異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)。經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)融合蛋白結(jié)果顯示，大部分表達(dá)產(chǎn)物以可溶形式存在，用Ni Sepharose柱層析純化融合蛋白。融合蛋白經(jīng)甲酸切割后，再次用Ni Sepharose柱層析去除帶有His-Tag的雜蛋白，最終得到純化的重組BNBD11。實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)了BNBD11在大腸桿菌中的融合表達(dá)，并純化了獲得的重組BNBD11。
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