研究樺褐孔菌原生質(zhì)體制備與再生條件。采用正交試驗(yàn)法確定復(fù)合酶比例,用單因素試驗(yàn)測(cè)定不同等滲液、酶解時(shí)間、樺褐孔菌菌齡、酶解溫度、再生培養(yǎng)基對(duì)樺褐孔菌原生質(zhì)體制備與再生的影響。結(jié)果表明:混合酶(纖維素酶5mg/mL、蝸牛酶15mg/mL、溶壁酶15mg/mL、崩潰酶15mg/mL)、菌齡為7d的菌絲,采用0.6mol/L MgSO4為滲透壓穩(wěn)定液,酶解溫度35℃,酶解時(shí)間5.5h,有利于原生質(zhì)體的制備。就原生質(zhì)體再生而言,酶解時(shí)間為3.5h制得的原生質(zhì)體,以MgSO4作為滲透壓穩(wěn)定液,以完全再生培養(yǎng)基(CYM)和麥芽酵母葡萄糖再生培養(yǎng)基(GYM)有利于原生質(zhì)體再生,再生率最高為0.13%。
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