通過超聲波破壁法、溶菌酶破壁法、反復(fù)凍融法和機械破壁法4種不同破壁方式對嗜熱鏈球菌SP1.1進行破壁處理,對菌體的破壁率、提取的β-半乳糖苷酶和乳酸脫氫酶兩種胞內(nèi)酶的活力進行分析比較,以確定適合于嗜熱鏈球菌細(xì)胞破壁方法及其最佳條件。結(jié)果表明:這4種菌體細(xì)胞破壁效果存在很大差異,其中經(jīng)溶菌酶處理胞內(nèi)酶提取效果最好,破壁率可達99.87%,β-半乳糖苷酶酶活力為0.387U,乳酸脫氫酶酶活力為2.375U,與其他3種方法的破壁效果差異極顯著(P<0.01)。優(yōu)化溶菌酶破壁條件,當(dāng)處理8mL菌濃度為1.3×109CFU/mL的樣品時,確定處理最佳溫度為37℃,時間為30min,酶(20000U/mL)用量為1mL,此時破壁率可達99.99%,β-半乳糖苷酶酶活力為0.429U,乳酸脫氫酶酶活力為2.431U。
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