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牛免疫球蛋白G的體外人源唾液酸化及Fc片段的制備
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 190 發(fā)表時(shí)間: 2022-03-23
作者: 李天慧,陳春旭,陳貴杰,孫怡,曾曉雄
關(guān)鍵詞: 牛免疫球蛋白G;Fc片段;體外糖基化;唾液酸
摘要:

建立將牛免疫球蛋白G(bovine immunoglobulin G,bIgG)糖鏈末端N-羥乙酰神經(jīng)氨酸酶切并連接人源N-乙酰神經(jīng)氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)的方法,在實(shí)現(xiàn)bIgG轉(zhuǎn)化為人源IgG(human IgG,hIgG)的基礎(chǔ)上,研究hIgG可結(jié)晶(Fc)片段的制備。結(jié)果表明:以170 U/mL神經(jīng)氨酸酶酶切bIgG(4.0 mg/mL)后,通過β-1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶和α-2,6-唾液酸轉(zhuǎn)移酶分別轉(zhuǎn)移半乳糖(galactose,Gal)和Neu5Ac殘基,可制備增加8.4 個(gè)Gal殘基和42 個(gè)Neu5Ac殘基的hIgG分子。此外,在10.0 mg/mL hIgG、m(木瓜蛋白酶)∶m(hIgG)=0.05、10.0 mmol/L半胱氨酸激活劑、2.0 mmol/L EDTA溶液、pH 7.0條件下,酶解3 h可制得hIgG的較高純度Fc片段,最終hIgG得率為71.7%,F(xiàn)c片段得率為20.8%。本研究為bIgG的產(chǎn)品開發(fā)和營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

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