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溶血性鏈球菌LAMP檢測(cè)方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 138 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 尹 歡,李 琦,陳江源,馬寅眾,李 睿,劉志國(guó)*
關(guān)鍵詞: 溶血性鏈球菌|環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)|檢測(cè)|檢出限
摘要:

目的:研究溶血性鏈球菌的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)檢測(cè)方法,實(shí)現(xiàn)對(duì)溶血性鏈球菌的快速檢測(cè)。方法:針對(duì)溶血性鏈球菌的scpA 基因設(shè)計(jì)4 條特異性LAMP 內(nèi)外引物進(jìn)行LAMP擴(kuò)增;優(yōu)化擴(kuò)增反應(yīng)條件;采用包括溶血性鏈球菌在內(nèi)的6 種不同菌株進(jìn)行LAMP 的特異性檢測(cè),并酶切鑒定;對(duì)溶血性鏈球菌菌液以無(wú)菌水進(jìn)行10 倍系列梯度稀釋后,進(jìn)行LAMP 擴(kuò)增檢測(cè)其靈敏度;將菌摻入牛奶樣本并進(jìn)行LAMP 檢測(cè)。結(jié)果:本法可快速靈敏地檢測(cè)出溶血性鏈球菌,反應(yīng)特異性高,檢出限為16.7CFU/mL,而牛奶樣本的檢出限則達(dá)10CFU/mL。結(jié)論:LAMP 法可用于食品溶血性鏈球菌的快速檢測(cè)。

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