利用離子交換和葡聚糖凝膠層析等技術(shù)從制作干酪的副產(chǎn)物乳清中提取乳堿性蛋白。分別以洗脫速度、洗脫溫度、洗脫液濃度為因素,進行L9(34)正交試驗,最終得出各因素對離子交換樹脂提取效果的影響主次順序依次為洗脫速度>洗脫溫度>洗脫液濃度;采用D072 強酸性陽離子交換樹脂提取乳堿性蛋白的最佳洗脫條件為洗脫速度2.50mL/min、洗脫溫度40℃、洗脫液濃度0.04mol/L。在該條件下的乳堿性蛋白提取率為7.55%。在制得的粗MBP 的基礎(chǔ)上,利用Sephadex G-100 型葡聚糖凝膠,蛋白分離范圍4000~150000D,對其進行純化,測得最終純度為83.55%。
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