采用同源基因克隆的方法,以苦蕎和甜蕎葉片為材料,提取總RNA,經(jīng)RT-PCR 擴(kuò)增獲得其二氫黃酮醇4- 還原酶基因(dfr)cDNA 序列,并通過(guò)T 載體克隆后測(cè)序。序列分析表明,獲得了苦蕎和甜蕎dfr 的全長(zhǎng)cDNA編碼序列,其1026bp 的全長(zhǎng)開放閱讀框(ORF)均編碼341 個(gè)氨基酸,并具典型的dfr 結(jié)構(gòu)特征和功能模塊。同源性分析顯示,苦蕎和甜蕎與其他植物的dfr 基因核苷酸相似性為71%~98%;根據(jù)氨基酸序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹表明,二者與豆科、桑科和薔薇科聚為一類。
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