為探索人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)在雞卵黃中積淀的可行性,開(kāi)發(fā)具有抗心血管疾病的功能性雞蛋,應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)分別構(gòu)建含有人t-PA 基因和t-PA 與雞卵黃高磷蛋白融合基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-tPA 和pPhosvitin-tPA,脂質(zhì)體包裹后分別注射于初產(chǎn)蛋雞的肝臟,Western blotting 和ELISA 檢測(cè)t-PA 基因在雞肝臟中的表達(dá)和在卵黃中的積淀情況,瓊脂糖平板溶圈法檢測(cè)期其活性。結(jié)果顯示,注射重組質(zhì)粒后7d,卵黃中有分子質(zhì)量為63kD 的t-PA 積淀,表達(dá)可持續(xù)5 周,高峰表達(dá)量分別為39.16mg/L 和53.92mg/L;瓊脂糖平板溶圈法檢測(cè)其活性表明,卵黃中的t-PA 具有激活組織纖溶酶的活性。實(shí)驗(yàn)證明了外源基因表達(dá)產(chǎn)物在卵黃中積淀這一途徑的可行性。
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