采用高效液相色譜(HPLC)法測定化橘紅中的多種香豆素成分,并建立10 種香豆素混合標準品的分離方法。這10 種香豆素標準品是羥甲香豆素、香豆素、7- 甲氧基香豆素、呋喃香豆素、6- 甲基香豆素、5,7- 二甲氧基香豆素、佛手內酯、歐前胡素、異歐前胡素和香檸檬亭。10 種香豆素的分離條件:分離柱Nucleosil C18 反相柱(150mm ×4.6mm,3μm),流動相水- 甲醇- 乙腈,三元梯度洗脫,起始流速0.3ml/min,流速0.3~1ml/min,柱溫35℃,分離波長315nm。標準品質量濃度范圍為0.078~15.000μg/ml,回歸方程的相關系數(shù)為0.999~1.000,線性關系極好。標準品連續(xù)5 次進樣和在48h 內多次進樣,保留時間和峰面積的相對標準偏差均不高于3.466%。對采自廣東省茂名市化州市10 個不同栽培地點的化橘紅樣品分析,除6- 甲基香豆素和5,7- 二甲氧基香豆素未在樣品分離中出現(xiàn)外,化橘紅樣品含有其余的香豆素成分。10 個樣品間在香豆素含量上存在顯著差異,其中7 號樣品含量最高,香豆素達1380μg/g 干粉,異歐前胡素為1226μg/g 干粉,分別達0.138%和0.123%。各樣品中基本以香豆素和異歐前胡素這兩種香豆素含量為主。
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