領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為探究植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）對過敏原原肌球蛋白（tropomyosin，TM）免疫活性的影響，以富集純化的TM為研究對象，利用植物乳桿菌的菌體、破碎內(nèi)容物、菌體碎片、胞內(nèi)酶提取液，以及去除蛋白、脂肪和脂磷壁酸、羧基酯化、氨基甲基化后的菌體分別水解TM 12～48 h，通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳、蛋白免疫印跡和競爭性酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）等方法測定免疫活性，利用表位多克隆抗體結(jié)合紅外光譜技術(shù)研究植物乳桿菌對TM二級結(jié)構(gòu)及其致敏表位的影響，以解析植物乳桿菌消減TM免疫活性的作用位點。免疫學(xué)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同提取物水解TM 48 h后，菌體對TM免疫活性的消減率最高（76.9%），而菌體碎片和氨基甲基化菌體的消減率最低，分別為60.7%、61.7%，表明植物乳桿菌對原肌球蛋白免疫活性有一定消減作用。紅外光譜及ELISA結(jié)果顯示植物乳桿菌各成分提取物會較大程度改變TM的二級結(jié)構(gòu)并破壞其致敏表位，而氨基甲基化菌體和菌體碎片對TM的α-螺旋結(jié)構(gòu)和致敏表位的破壞最小，且TM的折疊化結(jié)構(gòu)較少，對TM免疫活性消減效果最差。此外，研究發(fā)現(xiàn)氨基可能是植物乳桿菌消減TM免疫活性的一個重要作用位點。本研究可為食物過敏原的活性控制及低致敏性水產(chǎn)加工制品的開發(fā)提供理論參考。
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