
本研究確定了分離純化乳酸乳球菌細胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技術(shù)路線。用裂解液(50mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA-Na2,100mmol/LNaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)懸浮菌體(20ml/g),37℃下保溫3h,離心后取上清液即為粗酶液。粗酶液通過45%硫酸銨沉淀,DEAE-SephadexA-25和Sephacryl-S-300HR兩步層析,可以得到純化的細胞壁蛋白酶。蛋白酶提純倍數(shù)達到74.048%,最后回收率為14.865%,PAGE電泳檢測為一條帶,SDS-PAGE檢測蛋白酶為單體結(jié)構(gòu),分子量大約為53kD。用純化后CEP酶解乳清蛋白,酶解液ACE抑制率為45%。
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