篩選谷蛋白作為檸條籽蛋白生物信息模板,基于BIOPEP數(shù)據(jù)庫,選用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和V-8蛋白酶進(jìn)行虛擬酶解,通過驗(yàn)證水解度和亞油酸氧化抑制率,確定木瓜蛋白酶+10% V-8蛋白酶作為水解檸條籽蛋白優(yōu)選酶。經(jīng)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),獲得檸條籽蛋白優(yōu)化酶解工藝為水解溫度45 ℃、pH 5.0、水解時(shí)間2 h、酶添加量1%,采用質(zhì)譜鑒定富含活性片段的多肽序列,其中,檸條籽肽LDEPDPL的亞油酸氧化抑制率達(dá)到50.3%。因此,借助計(jì)算機(jī)輔助和酶法水解相結(jié)合的方法,為定向制備抗氧化肽提供了新的研究策略。
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