以產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)主要血清型O157:H7和O26:H11為實(shí)驗(yàn)菌,進(jìn)行發(fā)酵香腸接種實(shí)驗(yàn),研究發(fā)酵香腸生產(chǎn)過程中這兩種菌的存活情況,并采用反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription real-time polymerase chain reaction,RT-real-time PCR)的絕對(duì)定量方法分析不同生產(chǎn)階段菌體和產(chǎn)品中毒力基因表達(dá)變化。結(jié)果顯示:STEC接種組與未接種組之間乳酸菌數(shù)、乳酸含量、pH值、aw值在大多生產(chǎn)階段無(wú)顯著差異。香腸生產(chǎn)過程中大腸桿菌O157:H7和O26:H11存活菌數(shù)分別減少了1.51(lg(CFU/g))和1.39(lg(CFU/g)),均受到顯著抑制(P<0.05),但兩菌呈現(xiàn)出不一樣的受抑制過程。采用RT-real-time PCR絕對(duì)定量,消除菌數(shù)差異后發(fā)現(xiàn)菌體毒力基因表達(dá)在生產(chǎn)后期均顯著上調(diào)(P<0.05);單位質(zhì)量香腸中大多毒力基因表達(dá)量在發(fā)酵初期顯著增加(P<0.05),且所有毒力基因在生產(chǎn)末期終產(chǎn)品中仍有較高表達(dá)量。本研究表明:雖然發(fā)酵香腸生產(chǎn)過程中能有效抑制STEC,但卻增強(qiáng)了菌體毒力基因的表達(dá),且終產(chǎn)品中毒力基因存在較高表達(dá)量。
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