真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白具有免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤功效。巨噬細(xì)胞在腫瘤免疫治療中發(fā)揮重要的作用,M1型巨噬細(xì)胞具有很強(qiáng)的腫瘤殺傷能力和抗原遞呈能力。本研究通過真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白在體外對小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7經(jīng)典活化M1型的影響探究其抗腫瘤的作用機(jī)制。利用重組黑芝免疫調(diào)節(jié)蛋白(recombinant Ganoderma atrum immunomodulatory protein,rFIP-gat)干預(yù)RAW264.7細(xì)胞,用中性紅吞噬實驗測定細(xì)胞吞噬能力,一氧化氮(nitric oxide,NO)檢測試劑盒測定NO濃度,采用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測定腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA相對表達(dá)量。結(jié)果表明,rFIP-gat以劑量依賴的方式增強(qiáng)RAW264.7細(xì)胞的吞噬能力,促進(jìn)其產(chǎn)生NO,并提高iNOS和TNF-α基因的轉(zhuǎn)錄。因此,rFIP-gat可能具有誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞向M1型巨噬細(xì)胞分化的作用。
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