本實(shí)驗(yàn)在體外應(yīng)用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞建立炎癥模型的基礎(chǔ)上,探討沙蔥總黃酮水洗組分的體外抗炎活性。應(yīng)用CCK-8法檢測0、50、100、200、400、800 μg/mL沙蔥總黃酮水洗組分對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞增殖活力的影響;將細(xì)胞分為空白對照組、LPS應(yīng)激模型組及不同質(zhì)量濃度沙蔥總黃酮水洗組分預(yù)處理組,采用Griess法及酶聯(lián)免疫吸附測定法分別測定各處理組細(xì)胞上清液中NO濃度和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-10的質(zhì)量濃度,反轉(zhuǎn)錄實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測各處理組細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、髓樣分化蛋白(myeloid differential protein,MyD)88、核因子 κB(nuclear factor κB,NF-κB)mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果顯示:與對照組相比,沙蔥總黃酮水洗組分在50~800 μg/mL時對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞無明顯細(xì)胞毒性作用。與LPS應(yīng)激模型組相比,沙蔥總黃酮水洗組分能夠極顯著抑制促炎介質(zhì)NO、TNF-α、IL-1β、IL-6質(zhì)量濃度及其mRNA的表達(dá)(P<0.01或P<0.001);高度顯著提高抗炎細(xì)胞因子IL-10質(zhì)量濃度及其mRNA的表達(dá)(P<0.001),且呈劑量依賴效應(yīng);極顯著降低MyD88、NF-κB mRNA的表達(dá)水平(P<0.01或P<0.001)。由此得出,沙蔥總黃酮水洗組分對LPS誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞具有抗炎作用,其抗炎活性可能是通過抑制促炎性介質(zhì)NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌并提高抗炎性細(xì)胞因子IL-10的質(zhì)量濃度實(shí)現(xiàn)的,其作用機(jī)制可能與NF-κB信號通路有關(guān)。
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