本實驗探究較長時間酸應激對大腸桿菌O157:H7生物菌膜形成的影響。首先采用微孔板聯(lián)合結晶紫染色法比較大腸桿菌O157:H7不同菌株黏附性能差異,分析不同黏附力菌株菌膜形成曲線,進而選擇代表菌株采用平板計數(shù)法分析在較長時間酸應激時其菌膜的形成規(guī)律,最后采用共聚焦激光掃描顯微鏡(confocal laser scanning microscope,CLSM)比較黏附力不同的菌株在酸性環(huán)境下菌膜形態(tài)結構變化。結果表明,14?株菌株黏附能力有差異;不同黏附力菌株均在2?h開始產(chǎn)生黏附現(xiàn)象,但菌膜形成曲線有明顯差異。以中等黏附力菌株ATCC43895作為代表菌株進行酸應激實驗,結果表明pH值越低菌膜形成量越少,pH值相同時乳酸對浮游菌數(shù)和菌膜形成的抑制效應顯著高于鹽酸(P<0.05)。CLSM觀察結果表明,成膜能力較強的菌株J29和較弱的菌株CICC21530在中性和酸性培養(yǎng)液中均能形成一定結構的生物菌膜,但前者的菌膜形成量多于后者,酸性條件對成膜過程有抑制作用。提示乳酸能有效抑制大腸桿菌O157:H7菌膜形成過程,可為食品實際加工中該菌菌膜的消除技術提供科學思路。
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