為獲得高產(chǎn)VD原——麥角固醇平菇菌株(Pleurotus ostreatus),在原種PDA培養(yǎng)基活化的5?個(gè)平菇菌株搖瓶篩選確定優(yōu)勢(shì)菌株;采用響應(yīng)面法優(yōu)化平菇菌絲體液體培養(yǎng)基成分,活化菌絲固體栽培40?d左右出菇子實(shí)體,經(jīng)紫外單光(280?nm)照射后,采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)法同步檢測(cè)麥角固醇與VD2含量,通過(guò)場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡探索子實(shí)體不同部位細(xì)胞結(jié)構(gòu)對(duì)麥角固醇光轉(zhuǎn)化為VD2的影響,為富含VD平菇食用菌的新產(chǎn)品研發(fā)提供理論支持。結(jié)果表明:5?個(gè)篩選的實(shí)驗(yàn)菌株中,菌株P(guān)831麥角固醇含量高達(dá)3.25?mg/g,高于其他菌株1.0~3.0?倍,確定為優(yōu)勢(shì)菌株。Plackett-Burman試驗(yàn)表明,影響平菇菌絲體麥角固醇含量的培養(yǎng)基關(guān)鍵組分為蛋白胨、蔗糖、磷酸二氫鉀;采用Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化法確定蛋白胨0.35%、蔗糖3.48%、磷酸二氫鉀0.35%時(shí),平菇P831菌絲體麥角固醇含量達(dá)到3.64?mg/g,提高12%;HPLC法同步檢測(cè)麥角固醇及VD2含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)平菇子實(shí)體菌蓋與菌褶中麥角固醇及VD2含量均高于菌柄,電鏡結(jié)果顯示平菇子實(shí)體菌蓋中含有大量菌絲體與成喙?fàn)钔黄鸬逆i狀結(jié)構(gòu),菌褶表面被大量致密的孢子覆蓋,菌柄則以纖維管狀網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)為主,未見孢子。平菇食用菌絲體中鎖狀結(jié)構(gòu)和子實(shí)體中孢子是細(xì)胞分裂能力、新陳代謝旺盛的主要組織結(jié)構(gòu),推測(cè)麥角固醇與VD2含量差異可能與組織形態(tài)結(jié)構(gòu)及細(xì)胞新陳代謝能力有關(guān)。
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