目的:分析比較鳀魚來源和大豆來源蛋白肽產(chǎn)品的多肽組成及其對小鼠腸黏膜免疫功能的調節(jié)活性。方法:采用超高效液相色譜-高分辨多級質譜聯(lián)用技術,結合Peaks Online 1.7軟件,解析鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽的所有多肽序列,并比較其多肽組成的差異。采用環(huán)磷酰胺誘導腸黏膜免疫抑制小鼠模型,分析比較鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽對小鼠小腸黏膜結構、小腸黏膜免疫因子、免疫球蛋白水平和Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)/核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信號通路相關因子表達量的影響。結果:鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽的多肽組成有很大差異,只有11%的多肽序列相同。與模型組相比,補充鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽(300 mg/kg mb)30 d可以顯著提高小鼠脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù),減輕環(huán)磷酰胺造成的腸黏膜結構損傷,增加小腸絨毛長度,減小隱窩深度。同時,補充鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽還能夠改善環(huán)磷酰胺對小腸黏膜中免疫因子腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干擾素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)、白細胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和IL-13表達的抑制,上調免疫球蛋白A和分泌型免疫球蛋白A的分泌,并上調小腸中TLR-4、TLR-6、TLR-9和NF-κB基因的表達。結論:鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽可能是通過保護TLRs/NF-κB信號通路,進而促進小腸黏膜中免疫因子和免疫球蛋白的分泌,改善環(huán)磷酰胺對腸黏膜結構的損傷和腸黏膜免疫功能的抑制。雖然鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽的重均分子質量、氨基酸組成以及多肽組成有較大差異,但除了鳀魚蛋白肽對腸黏膜分泌型免疫球蛋白A的保護效果優(yōu)于大豆蛋白肽外,鳀魚蛋白肽和大豆蛋白肽在保護腸黏膜結構和調節(jié)小鼠腸黏膜免疫方面的活性無明顯差異。
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