將氫化可的松半抗原HYD通過活化脂法與鑰孔戚血藍(lán)蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶聯(lián)獲得氫化可的松完整抗原KLH-HYD,并對小鼠肌肉注射此抗原,使小鼠免疫;通過雜交瘤技術(shù)獲得1 株能夠穩(wěn)定分泌氫化可的松的單克隆抗體細(xì)胞株HYD-C1,并通過腹水制備大量抗體。將氫化可的松半抗原HYD和地塞米松半抗原DEX通過活化脂法分別與卵清蛋白(ovalbumin,OVA)偶聯(lián)作為包被原,建立糖皮質(zhì)激素的間接競爭酶聯(lián)免疫吸附檢測(indirect competitive-enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)方法。結(jié)果:在同源包被情況下氫化可的松靈敏度為1.63 ng/mL,異源包被情況下靈敏度為0.24 ng/mL;在交叉抑制實驗中,異源策略中的各糖皮質(zhì)激素靈敏度均高于同源策略中的結(jié)果,異源策略條件下很好地覆蓋了本研究中所檢測的糖皮質(zhì)激素,使該抗體具備良好的廣譜特異性。在異源策略添加回收實驗中平均添加回收率在77.5%~111.3%之間,落在合理范圍內(nèi),滿足檢測需求。結(jié)論:成功制備出氫化可的松單克隆抗體,建立了同源和異源策略糖皮質(zhì)激素檢測方法,結(jié)果發(fā)現(xiàn)異源策略中糖皮質(zhì)激素的靈敏度高于同源策略,并使該方法具有更好的廣譜特異性。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
電話: 010-87293157
地址: 北京市豐臺區(qū)洋橋70號
版權(quán)所有 @ 2023 中國食品雜志社 京公網(wǎng)安備11010602060050號 京ICP備14033398號-2