Escherichia coli ATCC13027能產(chǎn)生聚唾液酸(polysialic acid,PSA),為實現(xiàn)其產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用,采用菌種誘變結(jié)合發(fā)酵工藝優(yōu)化以提高PSA產(chǎn)量。首先采用低能氮離子束注入誘變獲取不同產(chǎn)量的變異菌株,然后比較3 株不同產(chǎn)量菌株在發(fā)酵過程呼吸商(respiration quotient,RQ)的變化規(guī)律,最后根據(jù)玉米漿干粉脈沖式補入對RQ的影響制定相應(yīng)的補料策略。結(jié)果表明:離子束注入量選擇10×1014 ion/cm2時,得到1 株P(guān)SA產(chǎn)量高達3.94 g/L的突變株,比出發(fā)菌株產(chǎn)量提高了36.81%。通過比較3 株菌的RQ變化規(guī)律發(fā)現(xiàn)PSA生產(chǎn)速率最高時對應(yīng)RQ值最低,而脈沖式補入玉米漿干粉對RQ會產(chǎn)生顯著影響(P<0.01),因此在50 L罐上發(fā)酵16 h后開始流加玉米漿干粉將RQ控制在0.8,最終PSA產(chǎn)量達到12.83 g/L,比對照提高了45.30%,比出發(fā)菌株產(chǎn)量提高了88.95%。本研究為PSA產(chǎn)業(yè)化提供了優(yōu)良的菌株及在線實時調(diào)控PSA生產(chǎn)的思路,為PSA產(chǎn)業(yè)化提供一定理論支持。
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