領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
通過對先前研究報道的7 個內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因的核苷酸序列分析，設(shè)計13 個擴增區(qū)域（擴增子）；利用208 個普通玉米品種（系）對這13 個擴增子進(jìn)行高通量測序與分析，并對其序列保守性、特異性、檢出穩(wěn)定性及其動態(tài)檢測范圍進(jìn)行評估，以獲得合適的基于二代測序技術(shù)定量檢測玉米DNA含量或拷貝數(shù)的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因擴增子。結(jié)果顯示，7 個內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因的13 個擴增子在208 個玉米樣品中的檢出率為94.7%～100%，而在水稻、大豆、棉花、白菜等25 個非玉米樣品中均未被檢出，基本符合內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因種內(nèi)高度一致與種間高度特異的標(biāo)準(zhǔn)；種內(nèi)保守性分析顯示E3-UBI-1擴增子不含單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）和插入缺失（insertion-deletion，InDel），而剩余12 個擴增子至少含有一個SNP或InDel；穩(wěn)定性分析結(jié)果顯示最不穩(wěn)定的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因擴增子是IVR，最穩(wěn)定的是ADH1-2；它們的動態(tài)檢測范圍為0.2～200 ng。綜合上述結(jié)果，ADH1-2與E3-UBI-1比較適合作為二代測序技術(shù)平臺中定量檢測玉米DNA含量或轉(zhuǎn)基因玉米成分的內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因擴增子。
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