目的:探討紫薯花青素(Solanum tuberosum anthocyanin,STA)對輻射致造血干細(xì)胞 (hematopoietic stem cell,HSC)/造血祖細(xì)胞(hematopoietic progenitor cell,HPC)衰老起保護(hù)作用的分子機(jī)制。方法:將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對照組、模型組、STA治療組和STA預(yù)防組,利用X射線照射構(gòu)建衰老細(xì)胞模型。給藥后用血細(xì)胞分析儀檢測各組小鼠血液指標(biāo);免疫磁性分選法分離純化各組小鼠Sca-1+HSC/HPC,并用衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-Gal)染色試劑盒對其進(jìn)行染色實驗并計算各組陽性率;利用HSC/HPC混合集落(colony forming unit-mixture,CFU-Mix)數(shù)評價各組細(xì)胞形成HSC/HPC集落能力與分化潛能;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期;實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)檢測p53和p21Waf1/Cip1 mRNA的表達(dá);Western blot檢測p53和p21Waf1/Cip1蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與對照組相比,模型組小鼠外周血指標(biāo)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)均極顯著降低(P<0.01),衰老細(xì)胞陽性率極顯著增加(P<0.01),Sca-1+ HSC/HPC形成CFU-Mix的數(shù)量極顯著減少(P<0.01),G0/G1期比例極顯著升高(P<0.01),G2/M和S期比例極顯著降低(P<0.01),p53和p21Waf1/Cip1 mRNA和蛋白的相對表達(dá)量極顯著增加(P<0.01),STA治療和STA預(yù)防均可分別顯著和極顯著恢復(fù)模型組小鼠以上指標(biāo),其中STA預(yù)防效果更好。結(jié)論:STA可以通過調(diào)節(jié)p53-p21Waf1/Cip1信號通路保護(hù)受到輻射的HSC/HPC。
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