應(yīng)用基于線粒體基因的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢測方法SN/T 3730.4—2013《食品及飼料中常見畜類品種的鑒定方法第4部分:驢成分檢測?實(shí)時熒光PCR法》和SN/T 3730.5—2013《食品及飼料中常見畜類品種的鑒定方法?第5部分:馬成分檢測?實(shí)時熒光PCR法》檢測騾肉時,存在馬、驢成分均可檢出的情況,與線粒體嚴(yán)格母系遺傳的理論相左。因此,本研究通過測序法和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的馬、驢成分檢測方法對騾肉進(jìn)行檢測,對SN/T 3730.4—2013用于騾肉檢測的結(jié)果進(jìn)行分析和討論。本研究基于線粒體基因和核基因聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)測序、SN/T 3730.4—2013、SN/T 3730.5—2013方法對9 份單一肉塊樣品進(jìn)行了檢測。結(jié)合線粒體基因和核基因的檢測結(jié)果,確定3 份騾肉均為馬騾肉;采用SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013方法對3 份馬騾肉均能檢出驢成分和馬成分,SN/T 3730.5—2013對馬騾肉中馬成分檢測的循環(huán)閾值(cycle threshold,Ct)≤20.00;SN/T 3730.4—2013對馬騾肉中驢成分檢測的Ct值在25.00~35.00范圍內(nèi),且以SN/T 3730.4—2013 中引物進(jìn)行的普通PCR產(chǎn)物測序結(jié)果顯示,3 份騾肉與馬、驢均不同源。分析認(rèn)為,出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因可能是SN/T 3730.4—2013靶序列以核內(nèi)線粒體DNA片段形式和較低的重復(fù)數(shù)出現(xiàn)在馬騾核基因組中,并且發(fā)生了部分堿基的插入、缺失。采用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 3730.4—2013和SN/T 3730.5—2013對已知來源于單一動物源性成分的樣品進(jìn)行馬、驢成分檢測時,當(dāng)馬成分檢測的Ct值≤20.00,同時驢成分檢測的Ct值在25.00~35.00范圍內(nèi)時,應(yīng)考慮馬騾成分存在的可能性。
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