基于體外人結(jié)腸腺癌細胞(Caco-2)單層模型,研究紅毛藻多糖(Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP)對大腸桿菌(Escherichia coli)黏附Caco-2細胞的影響以及潛在作用機制。采用CFDA-SE熒光標記技術(shù)分析BFP對E. coli黏附Caco-2細胞單層的影響;利用實時聚合酶鏈式反應(yīng)分析BFP對Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素fimH及E. coli黏附Caco-2細胞導致細胞產(chǎn)生的炎癥因子(白細胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-8、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α)和細胞緊密連接蛋白(閉鎖小帶蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)與Occludin)的基因表達情況,最終基于Western Blot分析驗證ZO-1、Occludin蛋白表達。結(jié)果表明,BFP在質(zhì)量濃度為400~800 μg/mL時能夠顯著抑制E. coli黏附Caco-2細胞單層;BFP主要通過下調(diào)Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素基因fimH的表達抑制細菌的黏附。此外,BFP可顯著抑制E. coli及其培養(yǎng)上清液誘導Caco-2細胞產(chǎn)生的炎癥細胞因子基因表達的上調(diào)、緊密連接蛋白(ZO-1與Occludin)及其基因表達的下調(diào)。綜上所述,BFP能夠抑制E. coli對Caco-2細胞單層的黏附,實驗結(jié)果可為其開發(fā)新型的抗菌產(chǎn)品以及BFP的高值利用和精深加工提供參考。
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