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—— 中國食品雜志社

2012年第33卷17期返回列表

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秦川牛宰后成熟過程中線粒體翻譯延長因子Tu與能量代謝的關聯(lián)性分析

內容: 目的：線粒體翻譯延長因子Tu（mitochondrial Tu translation elongation factor，TUFM）已被證明參與秦川牛宰后成熟過程中的細胞自噬活動，實驗探究該過程中TUFM表達與能量代謝變化的關系。方法：以秦川牛背最長肌為研究對象，測定4 ℃不同成熟時間（0、2、12、24、48、96、144、192 h）TUFM表達量及含量、葡萄糖（glucose，GLU）、乳酸（lactic acid，LA）、腺苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）、二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）、單磷酸腺苷（adenosine monophosphate，AMP）6 種物質含量以及乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、琥珀酸脫氫酶（succinate dehydrogenase，SDH）、磷酸丙糖異構酶（triose phosphate isomerase，TPI）、蘋果酸脫氫酶（malate dehydrogenase，MDH）、細胞色素c氧化酶（cytochrome c oxidase，COX）5 種酶活性的變化情況。結果：在秦川牛宰后成熟期間，GLU、ATP、ADP、AMP含量和LDH、SDH、TPI活性均呈下降趨勢，TUFM表達量、MDH活性及LA和TUFM含量均呈先上升后下降趨勢，COX活性呈先下降后上升再下降趨勢。能量代謝各指標和TUFM蛋白主要在宰后初期發(fā)揮作用，對宰后初期及宰后中后期分別進行Pearson相關性分析，結果表明，在宰后初期牛背最長肌中TUFM表達量與MDH、LA呈極顯著正相關（P＜0.01），與ATP、ADP、AMP、LDH、SDH、TPI、COX、GLU呈極顯著負相關（P＜0.01）。在宰后中后期，TUFM表達與所有指標（GLU、LA、ATP、ADP、AMP、LDH、MDH、SDH、TPI、COX）均呈極顯著正相關（P＜0.01）。結論：在宰后初期TUFM表達量逐漸增加，可為肌肉細胞提供能量從而用于能量代謝途徑，該過程可能是TUFM正向參與細胞自噬所致。在宰后中后期能量短缺時，TUFM可能抑制細胞自噬，優(yōu)先將能量用于除細胞自噬外的其他重要途徑（如能量代謝途徑）以維持細胞穩(wěn)態(tài)。綜上，在宰后成熟過程中TUFM具有雙重作用，可調節(jié)細胞自噬為能量代途徑提供能量，有助于維持宰后能量代謝持續(xù)的時間。

閱讀量: 167 發(fā)表時間: 2024-09-09
紅毛藻多糖抑制大腸桿菌黏附Caco-2細胞的機制

內容: 基于體外人結腸腺癌細胞（Caco-2）單層模型，研究紅毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide，BFP）對大腸桿菌（Escherichia coli）黏附Caco-2細胞的影響以及潛在作用機制。采用CFDA-SE熒光標記技術分析BFP對E. coli黏附Caco-2細胞單層的影響；利用實時聚合酶鏈式反應分析BFP對Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素fimH及E. coli黏附Caco-2細胞導致細胞產生的炎癥因子（白細胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-8、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α）和細胞緊密連接蛋白（閉鎖小帶蛋白-1（zonula occludens-1，ZO-1）與Occludin）的基因表達情況，最終基于Western Blot分析驗證ZO-1、Occludin蛋白表達。結果表明，BFP在質量濃度為400～800 μg/mL時能夠顯著抑制E. coli黏附Caco-2細胞單層；BFP主要通過下調Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素基因fimH的表達抑制細菌的黏附。此外，BFP可顯著抑制E. coli及其培養(yǎng)上清液誘導Caco-2細胞產生的炎癥細胞因子基因表達的上調、緊密連接蛋白（ZO-1與Occludin）及其基因表達的下調。綜上所述，BFP能夠抑制E. coli對Caco-2細胞單層的黏附，實驗結果可為其開發(fā)新型的抗菌產品以及BFP的高值利用和精深加工提供參考。

閱讀量: 165 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于全身體積描記技術評估代表性辣感風味物質的感官刺激強度

內容: 研究辣感物質氣溶膠吸入條件下辣感刺激對大鼠呼吸狀態(tài)的影響，通過考察多項呼吸功能指標的變化表征辣感刺激的強度。選取代表性辣感物質辣椒素和煙堿為研究對象，采用無束縛全身體積描記系統(tǒng)并結合霧化給藥裝置，實時監(jiān)測大鼠在不同質量濃度辣椒素和煙堿溶液霧化吸入下多項呼吸功能指標的變化。結果顯示，辣椒素和煙堿的感官刺激引發(fā)相同的呼吸模式，表現(xiàn)為低質量濃度促進呼吸，而高質量濃度抑制呼吸。低強度辣感刺激促進呼吸頻率上升、松弛時間縮短和呼氣中期流速增大；高強度辣感刺激降低呼吸頻率，延長松弛時間和降低呼吸中期流速。同時辣感刺激強度的增加還導致氣道狹窄指數(shù)的持續(xù)性增大。濃度效應曲線進一步表明辣感刺激強度與呼吸功能指標存在明顯的關聯(lián)性，可通過監(jiān)控氣道狹窄指數(shù)等的變化客觀表征不同辣感物質的感官刺激強度。本研究建立了客觀評估辣感物質感官刺激強度新方法，為在實驗動物層面進一步探討辣感風味感知的腦區(qū)效應機制提供了新的手段和參考。

閱讀量: 146 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于二維相關紅外光譜對pH值影響大豆分離蛋白二級結構含量的快速分析

內容: 為滿足不同種類食品對大豆分離蛋白（soybean protein isolate，SPI）不同功能性的需求，本研究利用紅外光譜快速采集70 組不同pH值處理后SPI的數(shù)據(jù)，探討pH值變化對SPI結構含量的影響。使用均值中心化、多元散射校正、標準正態(tài)變量變換和歸一化算法對紅外光譜數(shù)據(jù)進行預處理，基于二維相關紅外光譜提取特征波段，再利用偏最小二乘（partial least square，PLS）法和算術優(yōu)化算法-隨機森林（arithmetic optimization algorithm-random forests，AOA-RF）建立不同pH值條件下SPI結構及含量的預測模型。結果表明，經均值中心化和多元散射校正結合處理后，α-螺旋、β-折疊、β-轉角和無規(guī)卷曲模型的相對標準偏差分別為1.29%、1.60%、1.37%、7.28%，兩者結合對光譜數(shù)據(jù)的預處理效果最佳。預測α-螺旋和β-折疊含量最優(yōu)模型為AOA-RF（特征波段），校正集決定系數(shù)為0.935 0和0.926 6，預測集決定系數(shù)為0.856 8和0.870 1；預測β-轉角和無規(guī)卷曲含量最優(yōu)模型為PLS（特征波段），校正集決定系數(shù)為0.915 4和0.881 7，預測集決定系數(shù)為0.891 3和0.784 3。本研究結果可為工業(yè)生產過程中產品質量快速檢測和工藝條件控制提供理論支撐。

閱讀量: 156 發(fā)表時間: 2024-09-09
鮰魚骨膠原蛋白肽-鈣螯合物促進鈣轉運和成骨細胞分化作用

內容: 以實驗室前期制備的鮰魚骨膠原蛋白肽-鈣螯合物（F3-Ca螯合物）為原料，采用Caco-2細胞模型評價其對鈣轉運和吸收的影響，再分析其對hFoB1.19成骨細胞堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性以及分化關鍵基因和蛋白表達的影響。結果發(fā)現(xiàn)F3-Ca螯合物能使Caco-2細胞的鈣轉運量提高到0.31 mg/mL，并促進成骨細胞的礦化。當F3-Ca螯合物的質量濃度為100 μg/mL時，成骨細胞ALP的活性提高了53.68%。反轉錄聚合酶鏈式反應和蛋白質免疫印跡分析表明F3-Ca螯合物能提高成骨細胞中骨保護素（osteoprotegerin，OPG）、骨鈣素和Runt相關轉錄因子2的基因和蛋白表達水平，降低核因子受體激活因子-κB配體（receptor activator for nuclear factor-κb ligand，RANKL）的基因和蛋白表達水平，增大OPG/RANKL的比值，從而激活OPG/RANKL/核因子受體激活因子-κB信號通路，促進成骨細胞的增殖、分化和礦化，達到加強鈣吸收和抗骨質疏松的作用。本研究可為鮰魚骨的高值化利用和新型鈣補充劑的開發(fā)提供科學依據(jù)。

閱讀量: 181 發(fā)表時間: 2024-09-09
總狀蕨藻盾葉變種寡糖的酶解制備及其免疫調節(jié)活性的作用機制

內容: 將總狀蕨藻盾葉變種多糖經乳糖酶酶解、膜過濾、透析和凍干制備獲得總狀蕨藻盾葉變種寡糖（Caulerpa racemosa var. peltate oligosaccharide，CRVO-G），測定CRVO-G的相對分子質量與單糖組成，評價CRVO-G的免疫調節(jié)活性，并對其作用機制展開研究。結果顯示，CRVO-G主要是由相對分子質量分別為617.115、621.081和995.368的2 種四糖和1 種六糖組成的寡糖混合物，主要由半乳糖（51.0%）、甘露糖（21.3%）、葡萄糖（11.5%）、木糖（6.5%）、鼠李糖（2.3%）、葡萄糖醛酸（2.0%）、鹽酸氨基葡萄糖（1.8%）、巖藻糖（0.8%）、鹽酸氨基半乳糖（0.7%）、半乳糖醛酸（0.7%）、甘露糖醛酸（0.7%）和阿拉伯糖（0.6%）組成。此外，CRVO-G具有良好的免疫調節(jié)活性，能促進一氧化氮（NO）和免疫因子的釋放，如白細胞介素-1β、白細胞介素-6和腫瘤壞死因子-α。代謝組學和蛋白免疫印跡結果表明，CRVO-G可以促進巨噬細胞花生四烯酸代謝通路中血栓素A2和15-酮前列腺素F2α的合成，提高環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、誘導型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）和核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）的磷酸化蛋白的表達水平。研究表明，在巨噬細胞RAW264.7細胞中CRVO-G通過NF-κB/iNOS/COX-2途徑發(fā)揮免疫調節(jié)作用。

閱讀量: 176 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于分子對接及動力學模擬的紅曲橘霉素合成小分子抑制劑的高通量篩選

內容: 通過計算機模擬技術，對紅曲橘霉素合成關鍵酶CitE的抑制劑進行高通量篩選。首先，采用Alphafold 2對CitE蛋白進行同源建模，并與相似序列比對以預測配體結合區(qū)域；隨后，在Arthor數(shù)據(jù)庫中檢索天然配體和黃酮骨架類似物，構建了一個包含20 000 個化合物的配體庫；之后，通過Maestro對CitE蛋白和小分子化合物庫進行分子對接，篩選出潛在的CitE配體；并采用Gromacs動力學模擬評估結合穩(wěn)定性，通過MM/PBSA計算結合自由能，之后對蛋白-配體的結合模式進行分析，進一步確定了槲皮素、木犀草素、芹菜素、染料木素、5,4’-二羥基黃酮、漆黃素6 個小分子配體具有較強的CitE結合性能。固態(tài)及液態(tài)發(fā)酵結果表明，上述化合物具有顯著的橘霉素抑制活性。其中，固態(tài)發(fā)酵（20 mg/28 g干物料）添加上述化合物分別使橘霉素產量降低42.52%、48.81%、32.54%、32.57%、21.02%和13.67%，液態(tài)發(fā)酵添加（0.1 g/L）上述化合物分別使橘霉素產量降低33.77%、15.58%、33.33%、62.34%、58.87%、50.22%。本研究對建立高效、安全的紅曲發(fā)酵體系具有借鑒意義。

閱讀量: 160 發(fā)表時間: 2024-09-09
珍珠蚌肉二肽基肽酶-IV抑制肽的制備與分離

內容: 目的：以珍珠蚌肉為原料制備對二肽基肽酶（dipeptidyl peptidase，DPP）-IV具有抑制作用的生物活性肽。方法：利用兩步酶解法并優(yōu)化珍珠蚌肉酶解條件，篩選體外DPP-IV抑制活性較高組分進行超濾膜濃縮，SuperdexTM peptide 10/300 GL凝膠柱層析與反相高效液相色譜（reverse phase-high performance liquid chromatography，RP-HPLC）技術分離純化出酶解液中的DPP-IV抑制肽，最終通過液相色譜-串聯(lián)質譜鑒定其氨基酸序列。結果：中性蛋白酶與堿性蛋白酶對珍珠蚌肉均有良好降解效果，經3 kDa超濾膜濃縮后，酶解產物的DPP-IV抑制率可達67.4%。通過凝膠過濾柱和RP-HPLC進一步分離純化出6 個活性較高的肽段，序列分別為FNAPAM、FIPNY、IYNPPTPF、LAMPYP、FFVVMP和LAGMP。進一步，以分子對接的方式分析6 個肽段與DPP-IV的相互作用關系。結論：本研究利用珍珠蚌肉制備DPP-IV抑制肽，可為以水產加工副產物為原料制備功能性食品提供理論參考。

閱讀量: 138 發(fā)表時間: 2024-09-09
亞油酸誘導植物乳桿菌p-8產生共軛亞油酸的蛋白組和類組蛋白乙酰化分析

內容: 研究亞油酸（linoleic acid，LA）誘導下植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）p-8的蛋白組和類組蛋白乙酰化水平差異，探究共軛亞油酸（conjugated linoleic acid，CLA）產生的機制。結果表明，LA的最佳誘導質量濃度為1 mg/mL，在此質量濃度條件下，蛋白質組學分析發(fā)現(xiàn)，烯酰-酰基載體蛋白還原酶、酰基載體蛋白等脂肪酸合成的關鍵蛋白因子下調，脂肪酸合成下調，乙酰基轉移酶水平上調。Western blot結合體外添加NaAc實驗表明，乙酰輔酶A含量增加導致類組蛋白乙酰化水平提升。實時聚合酶鏈式反應檢測顯示，添加LA和NaAc使CLA相關酶、轉錄調控因子和sigma因子的mRNA表達升高，CLA含量也提高。相關性分析得出，乙酰輔酶A與LA水合酶轉錄水平和CLA含量之間呈顯著正相關，揭示乙酰輔酶A和乙酰基轉移酶含量上調導致類組蛋白乙酰化加強而上調CLA合成。結果為分子改良或科學調控乳酸菌以提高CLA轉化率奠定了基礎。

閱讀量: 182 發(fā)表時間: 2024-09-09
雞蛋過敏人群腸道菌群特征及其與血清細胞因子的相關性

內容: 目的：分析雞蛋過敏患者腸道菌群組成特征及其與血清細胞因子之間的關系。方法：共招募20 名受試者，采用16S rRNA基因測序方法測定并分析腸道菌群豐度及組成，采用酶聯(lián)免疫法測定血清中白細胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5等食物過敏相關細胞因子的水平；比較兩組之間腸道菌群結構與細胞因子水平的差異，并分析兩者之間的相關性。結果：與對照組相比，雞蛋過敏組血清IL-4、IL-5等細胞因子水平顯著升高（P＜0.05）。16S rRNA基因測序分析結果顯示，β-變形菌目（Betaproteobacteriales）、伯克氏菌科（Burkholderiaceae）和真桿菌屬（Eubacterium_hallii_group）等豐度在食物過敏組顯著富集（P＜0.05）。采用Spearman相關性分析發(fā)現(xiàn)食竇魏斯氏菌（Weissella cibaria）、大腸桿菌屬（Escherichia）與血清中細胞因子IL-4、IL-13水平呈負相關。而Burkholderiaceae和uncultured_Parasutterella豐度與轉化生長因子β1和IL-13呈正相關。結論：本研究在確定雞蛋過敏患者特異性腸道菌群，以及在探索腸道菌群在預防或治療雞蛋過敏發(fā)生方面具有一定參考意義。

閱讀量: 144 發(fā)表時間: 2024-09-09

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