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—— 中國食品雜志社
為了提高角質(zhì)酶AFLACUT-2的熱穩(wěn)定性，基于蛋白質(zhì)折疊自由能變化（ΔΔG）進行預測、篩選，并對突變體的酶學性質(zhì)進行表征。結(jié)果顯示，突變體Q163M在不影響酶活性的基礎上，其熱穩(wěn)定性明顯提高，在40 ℃條件下孵育168 h時剩余酶活力可以保持在86.09%，較野生型高；在60 ℃條件下，突變體Q163M的半衰期是野生型的1.68 倍。另外，相比于野生型，突變體Q163M對偏酸性環(huán)境也具有更好的耐受性。通過分子間作用力和分子動力學模擬初步闡明突變體Q163M熱穩(wěn)定性提高的機制。這些研究結(jié)果可為理性改造角質(zhì)酶熱穩(wěn)定性，提高其在高溫條件下水相合成風味酯的能力提供依據(jù)和策略。
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