多種真菌多糖近年來因其免疫調(diào)節(jié)活性成為保健食品領域研究的熱點。本實驗以食藥用真菌蛹蟲草提取物蛹蟲草多糖(Cordyceps militaris polysaccharides,CMP)為研究材料,初步探究CMP對小鼠巨噬細胞RAW264.7免疫活性的調(diào)節(jié)機制。噻唑藍實驗結(jié)果顯示CMP無細胞毒性,且100、200 μg/mL CMP可以明顯增強RAW264.7細胞活性;中性紅法、Griess法和酶聯(lián)免疫吸附檢測結(jié)果表明25~200 μg/mL的CMP以劑量依賴方式增強RAW264.7細胞吞噬活性并增加一氧化氮(nitric oxide,NO)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)分泌,腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌呈先升高后降低的趨勢,在100 μg/mL時達到最高值;抑制劑中和實驗結(jié)果顯示當Toll樣受體4(Toll-like receptors 4,TLR4)和甘露糖受體(mannose receptor,MR)受到抑制時,CMP誘導的RAW264.7免疫反應顯著降低,這表明TLR4和MR均為CMP激活巨噬細胞的受體;此外,Western blot結(jié)果顯示絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信號通路也參與CMP誘導的RAW264.7細胞分泌NO、TNF-α和IL-1β。表明TLR4和MR/MAPK信號傳導途徑在CMP誘導巨噬細胞RAW264.7產(chǎn)生免疫應答時發(fā)揮了重要作用。
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