以凡納濱對(duì)蝦(Penaeus vannamei)為原料,分離純化和鑒定過(guò)敏原肌質(zhì)鈣結(jié)合蛋白(sarcoplasmic-calcium-binding protein,SCP),對(duì)其理化性質(zhì)(免疫活性、熱穩(wěn)定性、pH值穩(wěn)定性及消化穩(wěn)定性)、二級(jí)結(jié)構(gòu)和抗原表位進(jìn)行研究。結(jié)果表明:采用蛋白粗提、硫酸銨分級(jí)沉淀、陰離子交換層析等步驟純化得到的蛋白分子質(zhì)量為21.6 kDa,經(jīng)鑒定,該蛋白為凡納濱對(duì)蝦SCP,肽段覆蓋率達(dá)93.26%。凡納濱對(duì)蝦SCP具有較強(qiáng)的免疫活性,在熱處理溫度≥65 ℃和強(qiáng)酸強(qiáng)堿條件下免疫活性減弱;SCP對(duì)腸液消化具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性,而對(duì)胃液消化穩(wěn)定性較差。凡納濱對(duì)蝦SCP的二級(jí)結(jié)構(gòu)中α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)卷曲的相對(duì)含量分別為26%、16.9%、17.5%、39.6%。利用生物信息學(xué)工具結(jié)合免疫學(xué)技術(shù)最終預(yù)測(cè)識(shí)別出8 條凡納濱對(duì)蝦SCP抗原表位。
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