為研究雙孢菇乙醇提取物(Agaricus bisporus ethanol extract,ABEE)保肝活性的物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制,采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)技術(shù)對(duì)ABEE的成分進(jìn)行分析鑒定,通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合CCl4致小鼠急性肝損傷動(dòng)物模型對(duì)其活性物質(zhì)及作用機(jī)制進(jìn)行分析。UPLC-MS/MS分析鑒定化合物75 個(gè),其中網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測與肝損傷活性相關(guān)化合物15 個(gè),作用靶點(diǎn)11 個(gè)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ABEE能夠顯著改善由CCl4導(dǎo)致的小鼠急性肝損傷,與模型組相比,高劑量組(1 000 mg/kg)肝功能指標(biāo)谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶得到了顯著恢復(fù)(P<0.001),同時(shí)小鼠體內(nèi)抗氧化能力得到顯著提高,與模型組相比,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活力顯著提高(P<0.001),丙二醛含量顯著下降(P<0.01)。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和Western blot技術(shù)對(duì)相關(guān)基因的mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,與模型組相比,高劑量組Bcl-2表達(dá)顯著上升(P<0.001),MYC、NF-κB1、RELA、MMP9表達(dá)顯著降低(P<0.01),證實(shí)了預(yù)測結(jié)果。因此,ABEE可能是通過水楊酸、棕櫚酸、α-亞麻酸、白楊素調(diào)節(jié)Bcl-2、MYC、NF-κB1、RELA的表達(dá)及其所在的化學(xué)致癌-受體激活等信號(hào)通路,從而發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。本研究結(jié)果表明ABEE可能是通過多成分、多靶點(diǎn)、多通路抑制細(xì)胞凋亡、癌變,抑制自由基脂質(zhì)過氧化來發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。
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