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葡萄籽提取物原花青素誘導(dǎo)人食管癌細(xì)胞ECA109凋亡
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時(shí)間: 2019-06-11
作者: 郭方明,李述剛,宋關(guān)玲,丁玉松,馮剛玲,牛 強(qiáng),徐上知,胡云華
關(guān)鍵詞: 葡萄籽提取物原花青素;人食管癌;細(xì)胞凋亡;核因子κB信號(hào)通路
摘要:

目的:探討葡萄籽提取物原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)誘導(dǎo)人食管癌細(xì)胞ECA109凋亡的效果及機(jī)制。方法:ECA109細(xì)胞用0、25、50、100、200、400 μg/mL GSPE干預(yù)24 h,噻唑藍(lán)法檢測(cè)并計(jì)算不同質(zhì)量濃度GSPE對(duì)ECA109細(xì)胞的活性抑制情況,選取半數(shù)抑制濃度(50 μg/mL)作為干預(yù)劑量;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法測(cè)定炎性因子及Bax/Bcl-2表達(dá)情況;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,qPCR)、Western blot檢測(cè)核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路和凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)情況。結(jié)果:不同質(zhì)量濃度GSPE作用24 h均可抑制ECA109細(xì)胞的增殖,細(xì)胞凋亡率由54.44%增加到82.80%;酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)結(jié)果顯示,相比于空白對(duì)照組,GSPE和NF-κB抑制劑BAY11-7082可顯著抑制細(xì)胞內(nèi)炎性因子前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的產(chǎn)生以及C型反應(yīng)蛋白(C reactive protein,CRP)的分泌(P<0.05);qPCR和Western blot結(jié)果表明GSPE和BAY11-7082處理使Caspase-3 mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著升高(P<0.05),NF-κB信號(hào)通路中IκB、p65、p50 mRNA表達(dá)量顯著降低(P<0.05),p-IκB、p65、p50相對(duì)表達(dá)量顯著下降(P<0.05)。結(jié)論:GSPE可通過抑制PGE2、CRP的產(chǎn)生誘導(dǎo)ECA109細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能與抑制NF-κB通路、活化Bax有關(guān)。

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