為了探討牡蠣蛋白肽對(duì)小鼠急性酒精性肝損傷(alcoholic liver disease,ALD)的保護(hù)作用并篩選出具有解酒護(hù)肝潛能的活性肽,提取牡蠣蛋白并制備牡蠣蛋白肽,對(duì)其進(jìn)行水解度、分子質(zhì)量分布及氨基酸含量的測(cè)定,以急性ALD小鼠為模型,檢測(cè)小鼠血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活力,肝臟中的乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase,ADH)、乙醛脫氫酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,谷胱甘肽(glutathione,GSH)、甘油三酯(triglyceride,TG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及肝臟病理學(xué)檢查,以評(píng)價(jià)各組樣品對(duì)急性ALD的改善作用,進(jìn)一步對(duì)具有顯著抗肝損傷活性的組分進(jìn)行質(zhì)譜鑒定與篩選。結(jié)果顯示,相較于模型組,樣品組小鼠血清中ALT和AST活性、肝臟中MDA和TG含量顯著下降,而肝臟中ADH、ALDH、SOD和GSH活力則明顯提高,肝臟的病理狀態(tài)也得到顯著改善,其中A-2 h組和N-4 h組效果最佳。進(jìn)一步通過(guò)質(zhì)譜鑒定發(fā)現(xiàn)A-2 h組含有1 536 條肽段,N-4 h組含有1 782 條肽段,對(duì)其進(jìn)行活性預(yù)測(cè)、篩選后得到10 條活性較高的牡蠣肽。分子對(duì)接結(jié)果顯示,F(xiàn)APPR、RFFYR、FPGQR與ADH具有強(qiáng)烈的結(jié)合能力,具備一定解酒護(hù)肝活性潛能。通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證其ADH激活活性,結(jié)果顯示,這3 條肽段均表現(xiàn)出一定的ADH激活活性。綜上,本研究篩選得到3 條具有解酒護(hù)肝活性潛能的活性肽,為開發(fā)牡蠣ALD治療藥物提供了思路。
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