領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
從花生中提取總RNA，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)得到花生過敏原Ara h 1基因，構(gòu)建pET-28a-Ara h 1表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入Rosetta（DE3）宿主表達(dá)菌中誘導(dǎo)產(chǎn)物表達(dá)，用鎳離子親和層析法純化得到目的蛋白。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示目的蛋白分子質(zhì)量約為75 kDa，與預(yù)計(jì)相符；經(jīng)質(zhì)譜鑒定為Ara h 1蛋白。用BALB/c小鼠模型評(píng)價(jià)重組Ara h 1蛋白的致敏性結(jié)果顯示，重組Ara h 1蛋白致敏小鼠血清中特異性抗體、Th2型細(xì)胞因子、組胺含量升高，空腸和肺組織發(fā)生病變，表明重組Ara h 1蛋白可以導(dǎo)致小鼠發(fā)生Th2型過敏反應(yīng)，且有與天然Ara h 1蛋白相似的致敏性。同時(shí)RBL細(xì)胞模型結(jié)果顯示重組Ara h 1蛋白還可導(dǎo)致RBL細(xì)胞脫顆粒，釋放β-己糖苷酶，進(jìn)一步表明重組Ara h 1蛋白具有致敏性。
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