以自制的環(huán)氧基修飾的Fe3O4磁性微球?yàn)檩d體固定化磷脂酶A1,采用響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化固定化條件,并研究固定化酶的酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明:最佳固定化條件為緩沖液pH?4.0、固定化時(shí)間1.9?h、酶液添加量3.6?mL/g,得到的酶活力為3?675?U/g,固定化率為61.1%。固定化酶與游離酶比較,最適pH值向堿性方向偏移1.0,最適溫度提高5?℃;貯藏穩(wěn)定性有一定程度的提高;在重復(fù)菜籽油脫膠8?個(gè)批次后,仍保留81.1%的酶活力。此外,通過X射線衍射、衰減全反射傅里葉變換紅外光譜、掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡等現(xiàn)代分析手段對載體進(jìn)行表征,表明成功制備納米尺寸的微球,且微球表面成功修飾上環(huán)氧基團(tuán)。
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