牡蠣是食源性諾如病毒傳播的重要載體,諾如病毒在牡蠣中的檢出呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性和組織分布差異。為了解諾如病毒在牡蠣中的蓄積規(guī)律和組織分布,采用實(shí)驗(yàn)室人工污染GII.4型諾如病毒并控制環(huán)境進(jìn)行牡蠣養(yǎng)殖,采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫組織化學(xué)方法,檢測(cè)牡蠣不同組織中諾如病毒的含量和分布。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果表明,GII.4型諾如病毒在牡蠣外套膜中的含量比較穩(wěn)定,在(8.75±0.36)×104~(9.12±0.49)×104 拷貝數(shù)之間;在牡蠣鰓中的含量先增加后減少,6 h時(shí)達(dá)到最高((1.15±0.15)×106 拷貝數(shù));在牡蠣消化道中含量逐漸增加,12 h時(shí)達(dá)(1.06±0.14)×106 拷貝數(shù)并趨于穩(wěn)定;24 h后GII.4型諾如病毒主要分布于牡蠣的消化道組織中;凈化對(duì)牡蠣體內(nèi)富集的GII.4型諾如病毒含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,GII.4型諾如病毒廣泛分布在牡蠣外套膜邊緣、鰓壁和消化道內(nèi)壁上,其分布隨時(shí)間變化趨勢(shì)與實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR測(cè)定結(jié)果一致。
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