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—— 中國食品雜志社
本研究利用Sephadex G-25和DEAE-32對小米抗氧化肽進行純化，利用醋酸纖維素薄膜電泳法測定小米抗氧化肽的純度，以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、超氧陰離子自由基、羥自由基清除實驗考察純化的小米抗氧化肽對自由基的清除能力。在細胞水平研究小米抗氧化肽對胰島細胞的保護作用，利用H2O2進行大鼠胰島素瘤細胞（INS-1）氧化應(yīng)激造模，采用2’,7’-二氯二氫熒光素二乙酸酯熒光探針法檢測細胞內(nèi)活性氧（reactive oxygenspecies，ROS）水平，3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴鹽法檢測細胞活力，采用流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡率，采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)檢測抗氧化酶的表達水平。結(jié)果表明：經(jīng)過Sephadex G-25和DEAE-32兩次層析，小米抗氧化肽達到了電泳純；50 μg/mL小米抗氧化肽對超氧陰離子自由基、羥自由基和DPPH自由基的清除率分別為（62.71±3.86）%、（73.56±4.51）%和（82.62±5.25）%；小米抗氧化肽能顯著提升H2O2損傷后細胞活力，降低細胞內(nèi)ROS水平，抑制H2O2誘導(dǎo)損傷的INS-1細胞的凋亡（P＜0.05），其可能的機制與超氧化物歧化酶1、過氧化氫酶、谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶、醌氧化還原酶1等抗氧化酶系的表達上調(diào)有關(guān)。結(jié)論：小米抗氧化肽對H2O2誘導(dǎo)損傷的INS-1細胞氧化應(yīng)激具有一定的保護作用。
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