bifidocin A是由Bifidobacterium animalis BB04代謝合成的一種新型廣譜高效細(xì)菌素。為探討該細(xì)菌素的群體感應(yīng)合成調(diào)控行為,本研究通過監(jiān)測(cè)發(fā)酵過程中菌體生長(zhǎng)及細(xì)菌素抑菌活性變化規(guī)律,分析菌體密度和細(xì)菌素合成的相關(guān)性;基于低產(chǎn)細(xì)菌素培養(yǎng)模型體系的構(gòu)建,檢測(cè)發(fā)酵上清液中是否存在群體感應(yīng)自誘導(dǎo)肽,判斷是否存在細(xì)菌素合成相關(guān)群體感應(yīng)系統(tǒng);并通過對(duì)發(fā)酵上清液中自誘導(dǎo)肽進(jìn)行提純和分子質(zhì)量測(cè)定,初步明確其分子特性。結(jié)果表明,當(dāng)菌體細(xì)胞達(dá)到活菌數(shù)為7.31(lg(CFU/mL))時(shí),細(xì)菌素才開始合成;發(fā)酵過程中,菌體密度與細(xì)菌素的合成呈現(xiàn)正相關(guān)性;成功構(gòu)建了低產(chǎn)細(xì)菌素培養(yǎng)模型體系,其培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度37?℃、培養(yǎng)基起始pH?5、培養(yǎng)基濃度1/10改良MRS(Man Rogosa Sharpe)培養(yǎng)基、接種量1%、培養(yǎng)時(shí)間24?h;基于此模型體系,確定發(fā)酵上清液中確實(shí)存在可以誘導(dǎo)細(xì)菌素合成的自誘導(dǎo)肽,細(xì)菌素bifidocin?A的合成是受群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控的;通過對(duì)發(fā)酵上清液進(jìn)行超濾管篩分、葡聚糖凝膠柱層析及高效液相色譜層析提純,獲得了高純度自誘導(dǎo)肽樣品;采用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行質(zhì)譜測(cè)定其分子質(zhì)量為3?587.253?Da。
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