目的:研究野陽合花色苷提取物的體外抗氧化活性,建立過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的中國倉鼠肺細(xì)胞 (V79-4細(xì)胞)氧化損傷模型,初步評價(jià)其抗氧化應(yīng)激作用。方法:采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析野陽合花色 苷組成;測定花色苷提取物對2’-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的清除能力;建 立H2O2誘導(dǎo)V79-4細(xì)胞氧化損傷模型,分別采用噻唑藍(lán)、硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物和熒光探針2’,7’-二氫二氯熒光黃 雙乙酸鈉測定花色苷提取物對V79-4細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。結(jié)果:野陽合提取物含有4 種花色苷,結(jié)合保留時(shí) 間和質(zhì)譜數(shù)據(jù)等信息,推測分別為矢車菊素-3-半乳糖苷、矢車菊素-3-(6”-香豆酰)葡萄糖苷、芍藥色素-3-葡萄 糖苷和芍藥色素-3-(6”-香豆酰)葡萄糖苷;花色苷提取物對ABTS+·和DPPH自由基有良好的清除效果,半抑制 濃度分別是(1.72±0.26) μg/mL和(0.74±0.24) μg/mL,清除能力優(yōu)于陽性對照水溶性VE;細(xì)胞氧化損傷模型 中,50~200 μg/mL的花色苷提取物預(yù)處理H2O2誘導(dǎo)V79-4細(xì)胞氧化損傷,能明顯抑制細(xì)胞存活率的下降和脂質(zhì)過 氧化,并降低損傷后胞內(nèi)活性氧簇水平。結(jié)論:野陽合花色苷提取物具有良好的體外自由基清除能力,并對H2O2 誘導(dǎo)的V79-4細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用。
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