研究3 種pH值條件下4 種聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)對(duì)卵白蛋白(ovalbumin,OVA)、卵轉(zhuǎn) 鐵蛋白(ovotransferrin,OVT)與溶菌酶(lysozyme,LYZ)的沉淀效率,根據(jù)變化規(guī)律建立無(wú)需后續(xù)脫鹽的OVA 分離新工藝。結(jié)果表明:PEG 4000、6000、8000及10000均可有效沉淀OVA、OVT及LYZ,沉淀率受PEG質(zhì)量分 數(shù)及pH值影響。其中pH 7.5、PEG 4000質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%時(shí),OVA、OVT及LYZ的沉淀率相差最大,當(dāng)pH值從7.5調(diào)至 5.5時(shí),3 種蛋白質(zhì)沉淀率的變化幅度相差也最大。由此建立如下分離工藝:首先向pH 7.5的蛋清液中加PEG 4000至 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%,離心收集上清液,即得純度88.1%的OVA,提取率為95.1%;再將所得上清液pH值調(diào)至5.5,離心 收集上清液,所得OVA純度提高至99.7%,提取率為87.3%。該工藝簡(jiǎn)便易行,有利于OVA的大規(guī)模制備及在食品 及醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。
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