以芝麻釀造醬油乙醇提取物(ethanol extract sesame sauce,SSE)為研究對象,探討其對1 mmol/L 2,2’-偶 氮二異丁基脒二鹽酸鹽(2,2’-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride,AAPH)引發(fā)的LLC-PK1豬腎近曲 小管上皮細胞氧化應激損傷的保護作用。方法:LLC-PK1細胞與不同質量濃度(10~100 μg/mL)的SSE預先共同 培養(yǎng)24 h后,用含AAPH的DMEM培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)4 h建立細胞損傷模型。細胞存活率用四甲基偶氮唑藍法檢測, 細胞內丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和總活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平分別以硫代巴 比妥酸比色法和2’,7’-二氫二氯熒光黃雙乙酸鈉探針法測定。細胞內過氧化氫酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化 酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷胱甘肽巰基轉移酶 (glutathione S-transferase,GST)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)活力和谷胱 甘肽(glutathione,GSH)含量按試劑盒說明書以比色法測定。結果表明,SSE預處理可以提高受損細胞存活率, 降低細胞內總ROS水平和MDA含量。同時,SSE還能提高受損細胞內抗氧化酶(CAT、SOD、GSH-Px)及γ-GCS活 力并提高細胞內GSH含量。實時熒光定量聚合酶鏈式反應分析也提示SSE能上調細胞內抗氧化物酶(CAT、SOD和 GSH-Px)的mRNA表達量。此外,SSE可以通過提高細胞內源性抗氧化系統能力來降低細胞內MDA和ROS水平, 并由此緩解AAPH對LLC-PK1細胞所造成的氧化應激損傷。
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