本實(shí)驗(yàn)利用小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞對(duì)綠茶多糖(green tea polysaccharides,GTP)、紅茶多糖(black tea polysaccharides,BTP)和烏龍茶多糖(oolong tea polysaccharides,OTP)的減肥作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。使用氣相色譜對(duì)GTP、BTP、OTP的單糖組成進(jìn)行分析。采用噻唑藍(lán)染色法測(cè)定3?種茶多糖(tea polysaccharides,TPs)對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖活力的影響。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)3?種TPs對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。采用傳統(tǒng)“雞尾酒”法誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞分化成脂后,測(cè)吸光度并計(jì)算其分化率。采用甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶(glycerol phosphate oxidase-peroxidase,GPO-PAP)法測(cè)定細(xì)胞中甘油三酯(triglyceride,TG)含量的變化。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技術(shù)測(cè)定與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)量。結(jié)果顯示3?種TPs均能顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖與分化(P<0.05)。添加100?μg/mL的TPs能使細(xì)胞分化率顯著下降至(62.00±6.61)%(GTP)、(82.95±4.25)%(BTP)、(97.24±5.80)%(OTP)。另外,在細(xì)胞培養(yǎng)至第5天檢測(cè)表明,這3 種TPs顯著促進(jìn)G0/G1期細(xì)胞數(shù)量的累積,細(xì)胞比例分別為(68.52±2.28)%(GTP)、(67.11±1.68)%(BTP)、(59.69±1.35)%(OTP)。RT-PCR分析結(jié)果顯示TPs可以調(diào)控相關(guān)脂肪細(xì)胞因子的表達(dá)。在本研究中,在3T3-L1前脂肪細(xì)胞中GTP的減肥作用強(qiáng)于BTP和OTP。TPs的加入上調(diào)脂聯(lián)素的表達(dá)從而激活腺苷酸活化蛋白激酶信號(hào)通路調(diào)控相關(guān)脂肪細(xì)胞因子的表達(dá),并最終抑制TG的合成與3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化。
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