巴氏葡萄球菌TS-82類胡蘿卜素裂解酶經(jīng)強(qiáng)陰離子柱、高效制備液相色譜和多肽分子篩純化得到液相級(jí)純酶(95.6%)。該酶比活力為125?U/g,純化倍數(shù)為446,回收率為2.39%。純化后的類胡蘿卜素裂解酶經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定,得其分子質(zhì)量為655.093?D。關(guān)于酶學(xué)特性,研究發(fā)現(xiàn)該酶對(duì)C40類胡蘿卜素底物的最適溫度為60?℃,而作用于β-阿樸-8?ˉ-胡蘿卜醛的最適溫度是50?℃,該酶的穩(wěn)定溫度為50?℃以下;該酶對(duì)所測(cè)定底物的最適pH值為3.0;該酶與5?種底物親和力排列為:玉米黃質(zhì)>蝦青素>β-胡蘿卜素>角黃質(zhì)>β-阿樸-8?ˉ-胡蘿卜醛;Al3+和Fe3+是該酶的強(qiáng)效催化劑,F(xiàn)e2+是該酶的強(qiáng)效抑制劑;H2O2在低濃度范圍內(nèi)(0~16?mmol/L)可促進(jìn)酶活性;低體積分?jǐn)?shù)乙醇(4%~16%)的添加對(duì)酶活性無明顯抑制作用。結(jié)果表明該酶具有很好的耐酸性和熱穩(wěn)定性,能夠適應(yīng)果酒環(huán)境,為其工業(yè)化應(yīng)用提供依據(jù)。
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