為了解市場上霉菌發(fā)酵食品能否擴增霉菌DNA,除了紅曲霉外其他曲霉是否具有pksCT基因,以及加熱滅菌條件對紅曲黃酒中pksCT基因降解的影響。從市售的11 種食品中提取DNA,選用ITS基因引物和pksCT基因引物進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴增,并電泳分析。分別用麥曲、紅曲發(fā)酵黃酒,對發(fā)酵前、發(fā)酵中、滅菌后、貯藏期樣品擴增pksCT基因并測定橘霉素質(zhì)量濃度;選擇滅菌溫度70、80、90、100 ℃,滅菌時間10、20、30 min,滅菌后樣品擴增pksCT基因。結(jié)果表明有4 種食品能用ITS引物擴增出條帶,但只有紅曲霉發(fā)酵的紅腐乳能擴增出pksCT基因。紅曲黃酒在發(fā)酵中、滅菌后能夠擴增出pksCT基因,并且在80 ℃滅菌20 min和90 ℃滅菌10 min條件下,仍然可以擴增出pksCT基因,但90 ℃滅菌20 min或100 ℃滅菌10 min,DNA受到破壞。紅曲霉發(fā)酵食品能夠擴增出pksCT基因,曲霉發(fā)酵的食品未能用pksCT基因引物擴增出條帶。通過PCR方法擴增出部分霉菌發(fā)酵食品的霉菌DNA并測序,有助于了解其加工中使用的菌種,繼而為發(fā)酵加工食品的終端監(jiān)測提供一種新方法。
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