領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
對吐溫-80提高L-賴氨酸產(chǎn)量的分子機(jī)制進(jìn)行探究。以鈍齒棒桿菌MT-M4 δproB為出發(fā)菌株，在菌株生長至對數(shù)初期36 h時(shí)，添加5 mg/mL吐溫-80進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，通過反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reversetranslate real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）監(jiān)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平、胞內(nèi)的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced form，NADPH）水平及α-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合物（α-oxoglutarate dehydrogenase complex，ODHC）的活力。搖瓶發(fā)酵結(jié)果表明，添加吐溫-80使L-賴氨酸產(chǎn)量提高了215%；RT-qPCR結(jié)果表明，編碼ODHC的基因odhA、sucB和lpdA、參與ODHC調(diào)控的基因pknG、dtsR和ppp以及合成NADPH的磷酸戊糖途徑基因zwf的轉(zhuǎn)錄水平均發(fā)生了變化，其中odhA、sucB、lpdA、pknG及dtsR1基因分別發(fā)生了上調(diào)，ppp基因下調(diào)，相應(yīng)ODHC活力提高了32.9%；zwf基因上調(diào)了17.6 倍，相應(yīng)胞內(nèi)NADPH水平提高了137%。因此，在對數(shù)生長初期36 h添加吐溫-80具有雙重功效，既提高了ODHC的表達(dá)又使NADPH積累，從而誘導(dǎo)L-賴氨酸的高產(chǎn)。
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